Binare vektoren ti-plasmid

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Die vorliegende Erfindung betrifft auch die Kombination der vorstehenden Ausführungsformen.

Pflanzengentechnik Agrobacterium Agrobacterium tumefaciens ist ein Gram-negatives Bodenbakterium aus der Familie der Rhizobien. Die Bakterien können über eine Verwundung in die Pflanzen gelangen und lösen dort Tumorwachstum aus. Die Wucherungen am Wurzelhals werden Wurzelhalsgallen genannt.

Inzwischen werden die meisten Proteine von kommerziellem Interesse in pro- oder eukaryotischen Wirtsorganismen rekombinant hergestellt. Somit ist die Expression eines gewünschten Proteins in Bakterien in vielen Fällen bevorzugt.

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Die natürlichen Biosynthese-Apparate von Pflanzenzellen sind in der Lage, auch solche, z. Allerdings sind die Expressionsraten in Pflanzenzellen oft sehr gering und in verschiedenen Kompartimenten dieser Zellen auch unterschiedlich.

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Apoplastische Expression konnte ebenfalls nachgewiesen werden, wenn binare vektoren ti-plasmid nur mit etwa einem Zehntel der Menge im Vergleich zur Lokalisation im ER. So wird z.

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Bei hohen Expressionsraten kann demzufolge eine Überlastung des Transportapparates oder der Speicherkapazität der Pflanzenzelle eintreten.

Die vorstehend beschriebenen Probleme hinsichtlich der Effizienz der rekombinanten Herstellung von Proteinen in Eukaryoten, insbesondere Pflanzen, wirdn bisher nicht bzw. Auch beschränkte sich die Fachliteratur bisher nur auf die Schilderung von Experimenten hinsichtlich der vergleichenden Bestimmung der Expressionsraten in einzelnen subzellulären Kompartimenten.

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Somit liegt der Erfindung im wesentlichen das technische Problem zugrunde, Mittel zur Steigerung der Ausbeute von in Eukaryoten rekombinant hergestellten Fremdproteinen zur Verfügung zu stellen. Die Lösung dieses technischen Problems wird durch die Bereitstellung der in den Patentansprüchen gekennzeichneten Ausführungsformen erreicht.

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Die binare vektoren ti-plasmid Erfindung betrifft ein Verfahren, das die bisher im Stand der Technik vorhandenen Beschränkungen in binare vektoren ti-plasmid Effizienz der Fremdproteinbiosynthese in Eukaryoten, insbesondere in Pflanzenzellen, minimiert. So bietet sich für das "Molecular Farming" in transgenen Pflanzen durch die vorliegende Erfindung die Möglichkeit, wesentliche Erhöhungen der Expressionsraten fremder Proteine zu erreichen.

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Somit werden beispielsweise die Speicherpotentiale des ER und des Apoplasten gleichzeitig genutzt. Weiterhin können zusätzlich Gene eingebracht werden, die für vakuolär oder im Golgi-Apparat lokalisierte scFv-Antikörper kodieren.

Seitdem wurde das Verfahren mehrfach optimiert.

Somit können in diesem Ausführungsbeispiel der vorliegenden Erfindung die Speicherpotentiale von vier subzellulären Kompartimenten miteinander kombiniert werden. In einer alternativen Ausführungsform werden die Fremdproteine nicht durch nukleäre Expression und Transport in Organellen, d.

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Plastiden oder Mitochondrien, produziert, sondern die entsprechenden Gene werden durch direkte Transformation von Plastiden oder Mitochondrien mittels geeigneter Vektoren in diese Organellen eingeschleust und das für das betreffende Protein kodierende Gen direkt in diesen Kompartimenten exprimiert.

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